中南大学湘雅医院联合上海南方动物模式生物科技有限公司,利用CRISPR/Cas9技术通过同源重组的方式研制了HBx肝脏过表达转基因小鼠,近日被鉴定为实验动物新资源,收录于国家动物模型资源共享信息平台。
小鼠具有以下优势:首先,小鼠构建选取Hipp11(H11)安全岛位点插入。H11位点位于小鼠 11 号染色体,处于Eif4enif1和Drg1两基因之间,这一位点区域序列中插入的外源基因可受外源特定启动子稳定驱动,不受周围基因表达的影响,表达高效稳定。同时该位点已被证实插入基因不会影响宿主基因的表达,具有较好的安全性。其次,本小鼠构建采用了CRISPR/Cas9基因编辑技术,有效避免了随机插入带来的对宿主基因组的破坏。第三,本小鼠构建的敲入载体添加了flag标签和共轭表达的Luciferase序列,为检测基因表达提供了便利。最后,本小鼠采用了Alb启动子驱动,可在肝脏肝细胞中特异性表达。综上,该转基因小鼠构建成功,外源HBx蛋白表达稳定,可为研究HBx基因在肝脏生理、病理情况下的功能和机制提供方便。
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